Neofect™ siRNA transfection reagent

產(chǎn)品介紹

Neofect™ siRNA transfec on reagent 一款專門用于siRNA轉(zhuǎn)染試劑，轉(zhuǎn)染效率高，細(xì)胞毒性低，在多種細(xì)胞系及原代細(xì)胞中都表現(xiàn)出良好的轉(zhuǎn)染效果。

產(chǎn)品特征

轉(zhuǎn)染效率高；細(xì)胞毒性低；無需換液，操作簡(jiǎn)單。

實(shí)驗(yàn)流程  （以6孔板為例）

1.細(xì)胞鋪板

提前一天將細(xì)胞種植在6孔板中，以轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度30%-70%為宜。

2.siRNA制備（可選）

使用RNase-free ddH20 溶解 siRNA干粉，終濃度為 20 uM。

即使用125 plddH20溶解10D(約 33 g 或2.5 nM) siRNA干粉充分震蕩使其溶解

3.轉(zhuǎn)染合體制備

1)準(zhǔn)備2個(gè)無菌 EP 管，各加入100 pL OPTI-MEM 培養(yǎng)液，

2)第一管加入5pL Neofect，輕柔混合10次。

3)另一管加入5uLsiRNA(20pM)溶液，振蕩混勻。4)將 Neofect混合液滴加到 siRNA 合液中，輕柔混，室溫靜置 30 min，轉(zhuǎn)染復(fù)合體制備完成4.細(xì)胞轉(zhuǎn)染

4.細(xì)胞轉(zhuǎn)染

1)轉(zhuǎn)染:將轉(zhuǎn)染復(fù)合體滴加入細(xì)胞培養(yǎng)液中，輕搖混勻，轉(zhuǎn)入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

2)換液(可選):若有明顯細(xì)胞毒性，轉(zhuǎn)染 12-24 h，更換成新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)液。

3)驗(yàn)證:轉(zhuǎn)染24-48 h，利用qPCR或Western blot 檢測(cè)目的甚因表達(dá)水平

 按照Neofect與siRNA(20uM)=1:1的體積混合，不同細(xì)胞可適當(dāng)提高siRNA的用量進(jìn)行優(yōu)化。

儲(chǔ)存安全

常溫運(yùn)輸，儲(chǔ)存于4℃，有效期18個(gè)月。

注：本產(chǎn)品僅供研究使用，不可用于人或動(dòng)物的體外診斷與治療。
      For labortory use only. Not for diagmpstic or therapeutic use.